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TTX持续阻滞大鼠坐骨神经对生长相关蛋白表达的免疫组化研究

时间:2010-08-23 14:33:04  来源:  作者:

       方法:48只Wistar大鼠随机分成4组:A组(正常+生理盐水)12只;B组(正常+TTX阻滞)12只;C组(神经切断+生理盐水)12只;D组(神经切断+TTX阻滞)12只。B、D组按10ug/kg,给药容积1ml/kg给予TTX稀释液阻滞坐骨神经,A、C组给予相应容积的生理盐水。每12小时注射一次。神经切断组大鼠在戊巴比妥纳腹腔注射麻醉下,无菌条件下暴露右侧坐骨神经,在梨状肌下孔下方约1cm处切断坐骨神经,随后逐层缝合伤口常规喂养。大鼠坐骨神经阻滞采用Thalhammer等描述的经皮注射局麻药的方法。TTX单次阻滞药效持续13小时以上,其作用特点可见Kohane等的相关研究报道。按实验时间段处死并取材L5节段实验侧背根神经节,并用免疫组织化学染色方法研究生长相关蛋白表达的情况。
       结果:A、B、D三组GAP-43的表达无明显差别(P>0.05);C组GAP-43的表达在一周内不断增强,与其他三组比较,表达有明显差别(P<0.05)。

                                                                                                                                   

1 GAP-43阳性神经元细胞的平均光密度(AOD)
组别
持续阻滞时间(天)
1
3
7
A(正常+生理盐水)
0.221±0.015
0.227±0.019
0.225±0.023
B(正常+TTX阻滞)
0.229±0.020
0.230±0.022
0.227±0.025
C(神经切断+生理盐水)
0.403±0.018*
0.498±0.011*
0.564±0.026*
D(神经切断+TTX阻滞)
0.223±0.012
0.234±0.010
0.217±0.021
 

       表中数值为各组5张片的AOD平均值。*表示C组与A、B和D组表较,P<0.05,差别有统计学意义。
       结论:TTX阻滞正常神经的生物电活动的传导,但是并不引起GAP-43的表达变化;当在神经损伤后持续给予TTX阻滞,却可以抑制GAP-43的过度表达,防止了神经源性疼痛的发生。表明TTX阻滞的Na+依赖的电压门控通道,可能参与了神经源性疼痛的发生和中枢神经的可塑性变化。
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