[ABSTRACT]

Objective ：To compare of oxygen carrying capacity and mean cell age of RBCs of shed blood salvged from field and periph erythrocytes.

Methods ：Thirty ASA ⅡorⅢ patients aged 20-66yr undergoing surgical intervention were enrolled in this study.ZITI-2000 cell saver system was used for intraoperative blood salvage.The samples of blood salvged from field and periph erythrocytes before anesthesia. were obtained.The pH,PO2,SpO2 were detected .The P50 were calculated according formula. Euzymelinked immunosorbent assay were used to detecte the concentration of 2-3-DPG in RBCs.Chemical method were used to detecte the activity of pyruvate kinase.

Results ：There were no significent differences in P50,pH, concentration of 2-3-DPG in RBCs and activity of pyruvate kinase between the two groups.The pH of the salvaged RBC was significantly higher than that of periph erythrocytes before anesthesia（P<0.05）.

Conclusion： There were no significent differences in oxygen carrying capacity and mean cell ageof RBCs between salvged RBCs andperiph erythrocytes.
[Key words] Erythrocytes ; Oxygen carrying capacity ; Red cell life span ;Blood transfusion ,autologous
        有研究认为手术创面的组织表面及空气与手术野的红细胞相接触会对红细胞产生破坏作用[1，2],组织细胞损伤后释放的各种细胞因子与红细胞接触后也对红细胞造成一定程度的损伤[3]。术中洗涤式自体血液回收全程处理中的负压吸引、微孔滤过、高速离心及大量清洗液清洗等程序也会对患者自体血红细胞造成一定破坏甚至导致红细胞破裂溶血[4]，因而回收自体血红细胞内在质量尤其是关于红细胞的携氧、供氧能力以及寿命等评价输血效果的指标日益受到关注，对此虽有一些研究[5，6]但缺乏进一步的深入探讨。本文拟比较患者术中回收自体血与麻醉前外周静脉血红细胞P50、2,3-二磷酯甘油酸(2,3-DPG)浓度以评价回收自体血红细胞的携氧供氧能力并比较2者红细胞丙酮酸激酶(PK)的活性判断2者平均年龄的差异，为临床应用术中回收式自体输血提供依据。

一、资料与方法
        病例选择 预计术中出血量超过400ml，ASAⅡ或Ⅲ级，拟行术中自体血液回收的手术患者共30例，男女不限，年龄30～64岁，体重55～65kg。手术种类包括全髋关节置换术、脑膜瘤切除术、脑动脉瘤夹闭术、门脉高压症门体分流术、输卵管妊娠输卵管切除术、非体外循环下冠脉搭桥术等。所有患者既往无血液系统疾病；无恶性肿瘤及慢性失血性疾病；无高血脂血症及血电解质异常；3个月内未输入异体血，血、尿常规及生化检查均未见异常；回收血量过少，血液回收机未探及血层、获取血样前输入异体血者排除本研究。
       麻醉方法 根据手术要求及患者一般情况分别应用静吸复合全麻或硬膜外麻醉。均未用术前药。

        全麻方法：静脉注射异丙酚1.2～2mg/kg、罗库溴胺0.6mg/kg和芬太尼2μg/kg行麻醉诱导,气管插管成功后接Ohmeda210型麻醉机（Ohmeda公司，美国）行机械通气，潮气量8～10ml/kg,呼吸频率12次/min吸呼比1：2；术中吸入1.5%～2.5%异氟烷间断静脉注射芬太尼和维库溴胺维持麻醉。硬膜外麻醉方法：于手术切口范围相应间隙穿刺置管成功后，注射2%利多卡因5ml无全脊麻征象后间断追加2%利多卡因5～8ml维持麻醉，术中常规面罩吸氧，氧流量5L/min。术中持续监测血压、心电图、脉搏血氧饱和度，全麻患者维持呼气末二氧化碳分压35～45 mm Hg（1kPa=7.5 mm Hg）。术中静脉输注复方乳酸钠林格氏液和６％羟乙基淀粉，速度１０ml•kg-１•h-１，晶体液和胶体液比例为３：１。 
        血液回收方法： 在1000ml的生理盐水中加入肝素400mg作为抗凝液，手术开始前将一次性无菌管路安装在自体-2000型血液回收机(北京京精医疗设备公司)上，预先在储血器中加入50～100 ml抗凝液,手术开始后，通过中心负压（-200～- 150mm Hg）吸引将术野血和抗凝液一同收集到储血器中，抗凝液与收集的术野血体积比为1:5～7。储血器内的抗凝血经40μm的过滤装置去除组织碎片、脂肪滴、骨渣等，再通过5 000 r/min的速度离心，将红细胞分离到离心杯中,离心至离心杯的探头探到血层后用生理盐水洗涤，去除肝素和游离血红蛋白等杂质，洗涤至流出的液体清亮后将浓缩红细胞泵入输血袋内，于术中或术后回输。
二、分组与取材
        外周血组:于入室开放静脉后，使用肝素抗凝的注射器经外周静脉取血2ml。 
        回收血组: 经血液回收机全程血液回收处理获得的浓缩红细胞回输患者时经连接输血器的三通取血２ml。
       全部取血过程均要求血样与空气隔绝，保证血气分析结果的可靠性。
       使用CCX型血气分析仪（NOVA公司,美国）检测血液的pH、氧分压（PO2）、二氧化碳分压（PCO2）及血氧饱和度（SPO2），计算未校正P50,公式为：LogP50 =LogPO2-( Log[ SO2/(1 - SO2 ) ] ) /2.7 (0 < SO2 < 1)， 2.7为Hill斜率(氧离曲线的线性斜率) ，再根据校正方程LogP50 (pH7.4, PCO240mmHg, T37℃)=Log P50 未校正 –0.38×（pH实测－7.40）＋0.10×（Log pCO2实测－Log40）＋0.024×（T实测－37）, pH校正系数为-0.38，PCO2校正系数为＋0.10，温度校正系数为＋0.024，得到排除pH, PCO2和温度影响的校正P50[7]。采用酶联免疫法检测红细胞2,3-二磷酸甘油酸（2,3-DPG）含量，按照试剂盒（ADL公司，美国）的操作步骤进行测定。采用化学法检测红细胞丙酮酸激酶（PK）活性，按照试剂盒（南京建成生物工程研究所）的操作步骤进行测定。
        统计学处理 采用SPSS13.0 软件进行统计分析，计量资料采用均数±标准差（ ±s）表示，与麻醉前外周血比较采用成组t检验，与正常生理值比较采用独立样本t检验，Ｐ＜0.05为差异有统计学意义。

表1 回收血与外周血P₅₀、红细胞2,3-DPG浓度及PK活性的比较

（n=30， ±s）

与外周血组比较，*P<0.05